Ejercicios, Proyectos y casos
Durante años, el uso de animales en experimentación científica ha estado sujeto a numerosas controversias, tanto desde un punto de vista ético como científico. Aún así, sigue siendo la base fundamental en numerosos temas de investigación en ciencias biomédicas, lo cual hace que su uso sea imprescindible. Por ello, en base a la óptima utilización de estos animales, se hace necesaria una adecuada racionalización de los esfuerzos y recursos disponibles. Los denominados “métodos alternativos” son una eficaz herramienta para alcanzar este fin. Los métodos in vitro y los cultivos de células son quizá los más utilizados, lo cual hace que la asignatura se centre fundamentalmente en éstos. El licenciado en Veterinaria, al igual que el titulado en otras licenciaturas, participa en labores de investigación en las que comúnmente se utilizan estos métodos, los cuales hacen uso a su vez de los conocimientos adquiridos en otras disciplinas tales como la Biología General, la Citología o la Bioquímica. En el abordaje de esta asignatura pretendemos transmitir conocimientos básicos sobre los métodos alternativos existentes, las bases fundamentales que sustentan estos métodos y los planteamientos elementales para elaborar y desarrollar cualquier trabajo de investigación. En la parte práctica el alumno trabajará en el laboratorio de cultivos de tejidos animales, realizando funciones propias de la investigación con células en cultivo, tales como cultivo masivo, mantenimiento, control de crecimiento y de contaminación, mediciones básicas, preparación de muestras, ensayos básicos de viabilidad y uso de equipos. Como objetivo específico se ha considerado el conocimiento de las bases científicas de estos métodos para el diseño de modelos experimentales que aporten similar información a la que se obtendría utilizando los clásicos experimentos con animales de laboratorio. Igualmente se considera de especial importancia la interpretación de resultados en su posible extrapolación y/o validación respecto a los experimentos efectuados con animales.
Trabajos prácticos dirigidos
Sesión 1. Descongelación de líneas celulares y estudio preliminar del cultivo.
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Sesión 2. Mantenimiento in vitro de los cultivos. Operaciones básicas.
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Test de microplasma
Sesión 3. Cultivos en suspensión (I). Preparación de cultivo de eritrocitos para estudio de citotoxicidad por espectrofotometría.
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Sesión 4. Cultivos en suspensión (II). Ensayo de citotoxicidad por espectrofotometría con eritrocitos.
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Sesión 5. Cultivos en monocapa (I). Subcultivo.
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Sesión 6. Cultivos en monocapa (II). Preparación de cultivo e inicio de ensayo de citotoxicidad basal.
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Sesión 7. Cultivos en monocapa (III). Evaluación de ensayo de citotoxicidad.
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Sesión 8. Cultivos en suspensión (III). Evaluación de la citotoxicidad por citometría de flujo.
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Sesión 9. Estudio de los cultivos mediante microscopía (óptica, electrónica, confocal).
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Estas prácticas se realizarán en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos y (SAI) y en los laboratorios del Área de Toxicología.





















